चाचणीचा सारांश आणि स्पष्टीकरण
मलेरिया हा डासांमुळे होणारा, हेमोलाइटिक, तापजन्य आजार आहे जो 200 दशलक्षाहून अधिक लोकांना संक्रमित करतो आणि दरवर्षी 1 दशलक्षाहून अधिक लोकांचा मृत्यू होतो.हे प्लास्मोडियमच्या चार प्रजातींमुळे होते: पी. फॅल्सीपेरम, पी. व्हायव्हॅक्स, पी. ओव्हेले आणि पी. मलेरिया.हे सर्व प्लास्मोडिया मानवी एरिथ्रोसाइट्स संक्रमित आणि नष्ट करतात, ज्यामुळे थंडी वाजून येणे, ताप, अशक्तपणा आणि स्प्लेनोमेगाली निर्माण होते.P. falciparum मुळे इतर प्लाझमोडियल प्रजातींपेक्षा जास्त गंभीर रोग होतात आणि बहुतेक मलेरियामुळे मृत्यू होतो.P. falciparum आणि P. vivax हे सर्वात सामान्य रोगजनक आहेत, तथापि, प्रजातींच्या वितरणामध्ये लक्षणीय भौगोलिक फरक आहे.
पारंपारिकपणे, मलेरियाचे निदान परिधीय रक्ताच्या जाड डाग असलेल्या गिम्सावरील जीवांच्या प्रात्यक्षिकाद्वारे केले जाते आणि प्लाझमोडियमच्या विविध प्रजाती संक्रमित एरिथ्रोसाइट्स 1 मध्ये त्यांच्या दिसण्याद्वारे ओळखल्या जातात.तंत्र अचूक आणि विश्वासार्ह निदान करण्यास सक्षम आहे, परंतु केवळ तेव्हाच जेव्हा कुशल सूक्ष्मदर्शकांनी परिभाषित प्रोटोकॉल 2 वापरून केले जाते, जे जगातील दुर्गम आणि गरीब भागांसाठी प्रमुख अडथळे प्रस्तुत करते.
मलेरिया पीएफ/पॅन अँटीजेन रॅपिड टेस्ट किट हे अडथळे सोडवण्यासाठी विकसित केले आहे.चाचणी P. फॅल्सीपेरम विशिष्ट प्रोटीनसाठी मोनोक्लोनल आणि पॉलीक्लोनल ऍन्टीबॉडीज, हिस्टिडाइन रिपीट प्रोटीन II (pHRP-II), आणि प्लाझमोडियम लैक्टेट डिहायड्रोजनेज (पीएलडीएच) साठी मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीजची एक जोडी वापरते, एक प्रथिने चार प्रजातींद्वारे उत्पादित केली जाते, पी प्लॅस्मोडियम इन्फेक्शन आणि प्लाझमोडियम इन्फेक्शनच्या चार प्रजातींद्वारे तयार केले जाते. फाल्सीपेरम आणि किंवा इतर तीनपैकी कोणतेही प्लास्मोडिया.हे प्रयोगशाळेच्या उपकरणांशिवाय अप्रशिक्षित किंवा कमीतकमी कुशल कर्मचार्‍यांद्वारे केले जाऊ शकते.
तत्त्व
पीएफ/पॅन मलेरिया रॅपिड टेस्ट किट हे लॅटरल फ्लो क्रोमॅटोग्राफिक इम्युनोएसे आहे.चाचणी पट्टीच्या घटकांमध्ये खालील गोष्टींचा समावेश आहे: 1) बरगंडी रंगाचा संयुग्म पॅड ज्यामध्ये कोलॉइड गोल्ड (pHRP II-गोल्ड कंजुगेट्स) सह संयुग्मित माउस अँटी- pHRP-II अँटीबॉडी आणि कोलॉइड गोल्ड (pLDH-गोल्ड कंजुगेट्स) सह संयुग्मित माउस अँटी-पीएलडीएच अँटीबॉडी असतात.
२) नायट्रोसेल्युलोज मेम्ब्रेन पट्टी ज्यामध्ये दोन टेस्ट बँड (पॅन आणि पीव्ही बँड) आणि कंट्रोल बँड (सी बँड) असतात.पॅन बँड मोनोक्लोनल अँटी-पीएलडीएच अँटीबॉडीसह प्री-लेपित आहे ज्याद्वारे प्लाझमोडियाच्या चार प्रजातींपैकी कोणत्याही प्रकारचे संक्रमण शोधले जाऊ शकते, पीएफ संसर्ग शोधण्यासाठी पीएफ बँड पॉलीक्लोनल अँटी-पीएचआरपी-II प्रतिपिंडांसह प्री-लेपित आहे आणि सी बँड शेळी-विरोधी माउस IgG सह लेपित आहे.
परीक्षणादरम्यान, रक्ताच्या नमुन्याची पुरेशी मात्रा चाचणी कॅसेटच्या नमुना विहिरी (एस) मध्ये वितरीत केली जाते, बफर विहिर (बी) मध्ये एक लिसिस बफर जोडला जातो.बफरमध्ये एक डिटर्जंट असतो जो लाल रक्तपेशी लिसेस करतो आणि विविध प्लाझमोडियम प्रतिजन सोडतो, जे कॅसेटमध्ये ठेवलेल्या पट्टीवर केशिका क्रियेद्वारे स्थलांतरित होतात.pHRP-II जर नमुन्यात सादर केले असेल तर ते pHRP II-गोल्ड कंजुगेट्सशी बांधील असेल.इम्युनोकॉम्प्लेक्स नंतर प्री-लेपित अँटी-पीएचआरपीआयआय अँटीबॉडीज द्वारे झिल्लीवर पकडले जाते, बरगंडी रंगाचा पीएफ बँड तयार करते, जे पीएफ पॉझिटिव्ह चाचणी परिणाम दर्शवते.pLDH जर नमुन्यात सादर केले असेल तर ते pLDH सुवर्ण संयुग्‍नांना बांधील.इम्युनोकॉम्प्लेक्स नंतर प्री-लेपित अँटी pLDH अँटीबॉडीद्वारे झिल्लीवर कॅप्चर केले जाते, बरगंडी रंगाचा पॅन बँड बनवते, जे प्लाझमोडियम सकारात्मक चाचणी परिणाम दर्शवते.पॅन बँडच्या अनुपस्थितीत, इतर तीनपैकी कोणत्याही प्लास्मोडियासाठी सकारात्मक चाचणी निकालाची शिफारस केली जाऊ शकते.
कोणत्याही चाचणी बँडची अनुपस्थिती (पॅन आणि पीएफ) नकारात्मक परिणाम सूचित करते.चाचणीमध्ये अंतर्गत नियंत्रण (C बँड) समाविष्ट आहे ज्यात बकरी-विरोधी IgG / माउस IgG (pHRP-II आणि pLDH-गोल्ड कंजुगेट्स) च्या इम्युनोकॉम्प्लेक्सचा बरगंडी रंगाचा बँड प्रदर्शित केला पाहिजे, कोणत्याही चाचणी बँडवर रंग विकसित होत असला तरीही.अन्यथा, चाचणी निकाल अवैध आहे आणि नमुन्याची दुसर्‍या उपकरणाने पुन्हा चाचणी करणे आवश्यक आहे.
